V prosinci 2019 začala série případů pneumonie neznámé příčiny z Wu -chanu, provincie Chu -pej a se brzy rozšířilo do většiny provincií a měst v Číně a mnoha dalších zemích v lednu 2020. Od 22:00 hod 27. ledna bylo v Číně hlášeno 28 potvrzených případů a 5794 podezřelých případů 2019-nCov. Thezdroj infekce viru byl odvozen jako Rhinolophus a současná úmrtnost je 2,9%.
Světová zdravotnická organizace (WHO) 12. ledna 2020 oznámila, že epidemii pneumonie způsobil nový typ koronaviru (2019-nCov). Koronavirus je druh viru, který se šíří mezi zvířaty. Typ nukleové kyseliny viru je jednovláknová RNA. Současně WHO také uvolnila informace o sekvenci nukleových kyselin nCov sdílené čínskými vědci, což poskytlo základ molekulární detekce pro detekci virů a umožnilo rychlou detekci a identifikaci patogenů.
WHO navrhuje, aby lidé, kteří mají akutní respirační onemocnění, jako je kašel, horečka, infekce dýchacích cest a byli ve Wuhanu do 14 dnů nebo byli vystaveni kontaktu s jinými pacienty, byli komplexně vyšetřeni. Dne 17. ledna 2020 vydala WHO „Laboratorní testování na nový koronavirus 2019 (2019-nCoV) v případech podezření na člověka, prozatímní pokyny, 17. ledna 2020“. Pokyny poukazují na to, že vzorky, které mají být odebrány od symptomatických pacientů, zahrnují respirační vzorky (výtěry z nosohltanu a orofaryngu, sputa, bronchoalveolární laváže atd.) A vzorky séra:
*Pro transport vzorků pro detekci virů použijte VTM (virové transportní médium) obsahující antimykotické a antibiotické doplňky. V případě bakteriální nebo houbové kultury přepravujte suché nebo ve velmi malém množství sterilní vody. Vyhněte se opakovanému zmrazování a rozmrazování vzorků.
Kromě specifických odběrových materiálů uvedených v tabulce také zajistěte, aby byly k dispozici další materiály a zařízení: např. Přepravní nádoby a vaky a obaly na odběr vzorků, chladiče a chladicí obaly nebo suchý led, sterilní zařízení pro odběr krve (např. Jehly, stříkačky a zkumavky), etikety a trvalé fixy, OOPP, materiály pro dekontaminaci povrchů.
K detekci virů lze použít vzorky séra k detekci viru imunologickou metodou, zatímco RTqPCR se doporučuje k detekci nukleové kyseliny nCov pro rychlejší a přesnější detekci. Jako virus
sekvence je obsah virové nukleové kyseliny ve vzorku rychle detekován pouze
výběr vhodných reagencií a odpovídajících primerů
(Diagnostická detekce Wuhanského koronaviru 2019 pomocí RTPCR v reálném čase, protokol a předběžné hodnocení k 13. lednu 2020) Jako lídr v oblasti extrakce a detekce nukleových kyselin v Číně společnost TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO., LTD. poskytla více než 10 milionům lidí detekční činidla pro virus rukou a nohou a viru chřipky A (H1N1). V roce 2019 byly extrakční a detekční činidla pro nukleovou kyselinu viru TIANGEN aplikována na 30 milionů vzorků afrického klasického moru prasat, což významně přispívá k diagnostice a prevenci afrického klasického moru prasat v Číně. TIANGEN poskytuje nejen rychlou a přesnou extrakci a detekci virů, ale také pohodlné a efektivní nástroje pro broušení tkání a automatické extraktory nukleových kyselin, které představují kompletní sadu řešení pro extrakci a detekci virů.
Automatizovaný roztok pro extrakci nukleových kyselin
Automatizované extraktory nukleových kyselin TIANGEN jsou automatické platformy pro extrakci nukleových kyselin metodou magnetických kuliček. Aplikace těchto platforem nejenže výrazně snižuje pracovní zátěž inspekčních a karanténních oddělení, ale také snižuje provozní chyby ruční extrakce a zajišťuje konzistenci a stabilitu kvality extrahované nukleové kyseliny.
Automatický extraktor nukleových kyselin TIANGEN má různé průchodnosti (včetně 16, 24, 32, 48, 96 kanálů) a odpovídající činidla lze použít k extrakci nukleové kyseliny z různých typů vzorků. TIANGEN také poskytuje přizpůsobené služby vývoje reagencií a integrace nástrojů podle různých experimentálních požadavků.
Homogenizátor tkání TGrinder H24
● Široce se používá k mletí a homogenizaci různých vzorků tkání a výkalů
● S homogenizační silou mletí 2–5krát větší než u tradičních nástrojů
● Rovnoměrné mletí a homogenizace, čímž se zamezí křížové kontaminaci
● Automatické ochranné zařízení k ochraně bezpečnosti laboratorního personálu
Automatický extraktor nukleových kyselin TGuide S32
● Propustnost vzorku: 1-32 vzorků
● Objem zpracování: 20-1000 μl
● Typ vzorku: Krev, buňky, tkáň, výkaly, viry a další vzorky
● Doba zpracování: Až 8 minut k získání virové nukleové kyseliny
● Režim ovládání: Režim duálního ovládání Windows Pad a tlačítka na obrazovce
● Vývoj platformy: Otevřená platforma, zdarma k přizpůsobení reagencií
● Sada magnetické virové DNA/RNA TGuide S32 (DP604)
● Široké použití: Vysoce kvalitní virovou DNA/RNA lze čistit ze séra, plazmy, vzorku stěru, roztoku pro ošetření tkání a různých roztoků pro ochranu před viry.
● Jednoduché a efektivní: Tento produkt je perfektně sladěn s automatickým extraktorem nukleové kyseliny TGuide S32, který dokáže extrahovat virovou DNA/RNA s vysokým výtěžkem, vysokou čistotou, stabilní a spolehlivou kvalitou.
● Následné aplikace: Purifikovaná nukleová kyselina je vhodná pro navazující experimenty virové PCR a real-time PCR.
Manuální extrakční roztok nukleové kyseliny
Jako lídr v oblasti extrakce a detekce nukleových kyselin má TIANGEN v Číně nejkomplexnější řadu produktů pro extrakci nukleových kyselin, které jsou ideální pro detekci koronavirů ze všech druhů vzorků: krev, sérum/plazma, tkáň, tampon, virus , atd.
Souprava DNA/RNA viru TIANamp (DP315)
● Vysoká účinnost: DNA a RNA viru vysoké kvality lze získat rychlým čištěním s vysokou opakovatelností.
● Vysoká čistota: Úplné odstranění znečišťujících látek a inhibitorů pro následnou aplikaci.
● Vysoká bezpečnost: Extrakce organickými činidly nebo srážení ethanolem nejsou nutné.
Řešení pro detekci virů RNA
1. Automatický pipetovací systém TEasy
● Vysoká přesnost: Chladicí blok může udržovat teplotu vzorku činidla pod 7 ℃ po dobu delší než 60 minut. Každý APM je kalibrován podle mezinárodních standardů, které mají vyšší přesnost než ruční pipetování.
● Snadná obsluha: Malá velikost. Lehká váha. Pro výměnu bloků není potřeba žádný nástroj. Vestavěný postup přípravy PCR/qPCR. Zjednodušený ruční provoz přípravy roztoku PCR.
● Široká aplikace: Lze použít pro pipetování destiček s 96/384 jamkami, PCR, qPCR, detekci genů a další vysoce výkonné experimenty.
Jednokroková sada FastKing RT-qPCR (sonda) (FP314)
FastKing One Step RT-qPCR Kit (Probe) (FP314) vyvinutý společností TIANGEN je souprava pro kvantitativní detekci fluorescenční reverzní transkripce založená na metodě sondy, která je speciálně navržena pro detekci stopových genů v různých vzorcích. KingRTase v soupravě je nová molekulárně modifikovaná reverzní transkriptáza, která má silnější afinitu k RNA a tepelnou stabilitu, se zlepšenou účinností reverzní transkripce a schopností rozšíření komplexních templátů sekundární struktury RNA. Rovněž je použita nová Taq DNA polymeráza s horkým startem, aby reakce PCR měla vyšší účinnost a specificitu amplifikace. Kromě toho souprava v největší míře zjednodušuje komponenty smícháním enzymu Taq a MLV do směsi enzymů a předmícháním iontového pufru, dNTP, stabilizátoru PCR a zesilovače do MasterMix, aby bylo možné vícekomponentní směšovací kroky
zjednodušený.
● Vysoká účinnost: Vynikající reverzní transkriptáza a DNA polymeráza zajišťují vysokou účinnost reakce
● Dobrá reverzibilita: Polymeráza může číst templát RNA s vysokým obsahem GC a komplexní sekundární strukturou
● Široké aplikace: Vysoká použitelnost na šablony RNA s nečistotami z různých druhů
● Vysoká citlivost: Šablony od 1 ng lze přesně identifikovat, zejména u šablon s nízkým výskytem
Příklad pro detekci viru RNA
Nukleová kyselina ptačí chřipky H5 byla extrahována pomocí sady TGuide S32 Magnetic Viral DNA/RNA Kit (DP604). K detekci RT-qPCR byla použita FastKing One Step RT-qPCR Kit (Probe) (FP314) pomocí specifických primerů a sond ptačí chřipky H5.
Pro detekci RT-qPCR byl použit ABi7500Fast. Výsledky antigenu viru ptačí chřipky H5 (ředění 10-2, 10-3, 10-4, 10-5, 10-6 a 10-7) ze 200 μl vzorků vykazují vysoký výtěžek extrakce nukleové kyseliny viru, který může splňovat následující potřeby reverzní transkripce, PCR, RT-PCR, real-time PCR atd. PCR v reálném čase přináší výsledky s vysokou citlivostí, dobrou opakovatelností a dobrou linearitou ředění gradientů. Přesně lze detekovat různé koncentrace vzorků virových nukleových kyselin.
Čas odeslání: 11. dubna 2021
